取精:
精子取出的時(shí)間與取卵的日子為同一天。取精前洗凈雙手,用自慰法留取精液。所給的小杯是無菌的,留取時(shí)不要觸摸杯緣及杯內(nèi)。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度離心法處理。
體外受精:
取卵后4~5小時(shí)將處理后的精子與卵子放在同一個(gè)培養(yǎng)皿中,共同培養(yǎng)18小時(shí)后,可在顯微鏡下觀察受精情況。若精子質(zhì)量太差,無法自然受精,則必須以顯微注射法強(qiáng)迫受精 (參考卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子顯微授精)。
胚胎移植:
受精卵在體外培養(yǎng)48~72小時(shí)可發(fā)育到8~16細(xì)胞期胚胎。此時(shí)依據(jù)患者的年齡、曾經(jīng)懷孕與否及胚胎的質(zhì)量,決定移植胚胎的數(shù)目,多余的胚胎可冷凍保存。胚胎移植一般不需麻醉。目前多在受精后2~3天移植胚胎,我所采用的是受精后3~5天胚胎移植。推遲胚胎移植的時(shí)間,對(duì)體外培養(yǎng)的條件要求就越高,但推遲移植時(shí)間更符合妊娠生理,同時(shí)也可通過自然篩選淘汰劣質(zhì)胚胎,可提高妊娠率,降低多胎率。
胚胎移植后補(bǔ)充激素:
目前我們多采用注射法給予黃體酮支持黃體。如果確定妊娠,則改用hCG繼續(xù)補(bǔ)充到懷孕10周。胚胎移植后14天,可由驗(yàn)?zāi)蚧虺檠_定是否妊娠。